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籽维中原每份约100mg

试验中,葡萄实际加入的籽维中原对照品为维生素E醋酸酯(加入量为8.5132mg),折算成维生素E(以α-生育酚计)的生素素和素E速测量为7.76mg,折算方法:维生素E(以α-生育酚计)/mg含量=维生素E醋酸酯/mg×430.71/472.75(其中,胶囊430.71为α-生育酚的花青分子量,472.75为DL-α-醋酸生育酚(即维生素E醋酸酯)分子量,维生参考标准GB1886.233—2016《食品安全国家标准食品添加剂维生素E》)。快定

5、葡萄中间精密度试验

称取葡萄籽维生素E软胶囊(批号20190115)内容物6份,籽维中原每份约100mg,生素素和素E速测精密称定,胶囊精密称取葡萄籽维生素E软胶囊(批号20190115)内容物0.1g于25mL烧杯中,花青加入10mL甲醇,维生置于70℃水浴中加热,快定振摇使内容物分散,葡萄立即转移至25mL容量瓶中,再用10mL甲醇分三次洗涤烧杯,洗涤液转入容量瓶,超声提取20min,取出,冷却至室温,用甲醇定容至刻度,摇匀,经0.22μm微孔滤膜过滤,作为供试品溶液。选用不同色谱柱、不同高效液相色谱仪分别测定样品中原花青素与维生素E含量,然后分别对两组分6个含量数据进行相对标准偏差统计,得到两组分含量的RSD均小于1.5%,表明使用该方法中间精密度良好(见表4)。

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6、加标回收率试验

称取已知原花青素与维生素E含量的葡萄籽维生素E软胶囊(批号20190115)内容物约50mg,共6份,精密称定,向样品中加入原花青素与维生素E醋酸酯混合对照品贮备液(原花青素5.435lmg/mL,维生素E醋酸酯2.1283mg/mL)4mL,精密称取葡萄籽维生素E软胶囊(批号20190115)内容物0.1g于25mL烧杯中,加入10mL甲醇,置于70℃水浴中加热,振摇使内容物分散,立即转移至25mL容量瓶中,再用10mL甲醇分三次洗涤烧杯,洗涤液转入容量瓶,超声提取20min,取出,冷却至室温,用甲醇定容至刻度,摇匀,经0.22μm微孔滤膜过滤,作为供试品溶液。色谱柱:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,DikmaDiamons订C18(4.6mm×150mm,5μm);流动相:甲醇;流速:1.0mL/min;检测波长:284nm柱温:30℃;进样量:10μL。测得原花青素与维生素E两组分的加标回收率平均值分别为95.4%、99.0%,RSD分别为2.3%、1.2%,试验结果见表5、表6,表明使用本方法检测回收率较高,准确度良好,结果可靠。

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7、样品含量测定

称取3批葡萄籽维生素E软胶囊内容物约100mg,批号20190115、20190116、20190l17,每批样品各3份,精密称定,精密称取葡萄籽维生素E软胶囊(批号20190115)内容物0.1g于25mL烧杯中,加入10mL甲醇,置于70℃水浴中加热,振摇使内容物分散,立即转移至25mL容量瓶中,再用10mL甲醇分三次洗涤烧杯,洗涤液转入容量瓶,超声提取20min,取出,冷却至室温,用甲醇定容至刻度,摇匀,经0.22μm微孔滤膜过滤,作为供试品溶液。色谱柱:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,DikmaDiamons订C18(4.6mm×150mm,5μm);流动相:甲醇;流速:1.0mL/min;检测波长:284nm柱温:30℃;进样量:10μL。按外标法以峰面积计算原花青素与维生素E(以α-生育酚计)含量。结果见表7。

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三、结论
本文采用高效液相色谱法建立葡萄籽维生素E软胶囊中原花青素和维生素E同时检测的快速分析方法。将维生素E醋酸酯对照品溶液注入配备DAD检测器的液相色谱仪,开启光谱采集,确定了维生素E醋酸酯的最大吸收波长为284nm。原花青素分子中含有苯环结构,在紫外光区也有很强的吸收,且在紫外区有唯一特征吸收峰,因此本方法确定液相色谱条件的检测波长为284nm。

本法确定采用超声波提取法可提高提取效率,解决了国标法测定维生素E时供试品溶液制备方法操作繁琐、检测时间长、重复性较差、需使用危险化学品等问题,同时解决了本需开展两相甲醇,流速1.0mL/min,检测波长284nm条件下进行液相色谱分析可以有效快速的测得葡萄籽维生素E软胶囊中原花青素和维生素E的含量。供试品溶液中原花青素和维生素E醋酸酯含量在12h内保持稳定。原花青素线性回归方程为y=4576.4x+8.0492,线性相关系数为R2=0.9998,线性范围为0.2806~2.8057mg/mL,平均回收率为99.4%。维生素E线性回归方程为y=2086.4x-8.5767,线性相关系数为R2=1,线性范围为0.1236~1.2358mg/mL,平均回收率为99.0%。且原花青素重复性与中间精密度试验RSD分别为0.9%、1.3%,维生素E重复性与中间精密度试验RSD分别为1.1%、0.8%。本方法重复性好,操作快速简便,专属性强,可用于葡萄籽维生素E软胶囊的质量控制。

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